新国标中有几个问题得到了卢老师的回答，感谢卢老师和大弟子的帮忙，由于前段时间忙，所以到现在才发上来和大家一齐分享。当时跟卢老师是通过电话沟通，可能转述有不完整或不妥当的地方，希望卢老师指正。也希望其他论坛的大虾一齐讨论。
1.菌落总数：6.2.2提到可以覆盖一层琼脂以防蔓延菌的生长，但这样会不会影响专性需氧菌的生长？
答：有一点影响，但是影响不大。因为4mL的琼脂厚度不大，氧气还可以渗透进去。
2.LST肉汤和BGLB肉汤分装为10mL，这个量是不是个规定值？和稀释度有关系吗？
问这个问题主要是我们一直的做法都是随意加，就算03年乳糖胆盐规定分装的毫升数，但是我们一直没有按规定的量执行。
答：如果分装不按规定的量，加上样液后，肉汤的浓度就会改变，会影响抑菌的效果。
3.双岐杆菌菌落计数需要做革兰氏染色和过氧化氢酶试验，但新标准里没有了详细说明，是不是还按旧标准挑5个可疑菌落做鉴定？做革兰氏染色的适合是挑48h培养物，那样会不会有革兰氏不定型的情况出现？
答：挑5个或10个做染色和过氧化氢酶都可以，似乎菌落的多少而定，多的就取多点。双岐杆菌染色本来就阴性和阳性会同时存在，双岐杆菌培养会不停的产酸，可能有些会死掉。
4.乳酸菌的菌落计数分成不同菌采用不同的培养基和培养条件，但如果样品中几种菌都有，那就需要全部培养基都用上，那么最后的结果应该怎样计算？
答：取最大值的那个进行计数。兼性厌氧条件下生长的在厌氧条件下生长的更好。
5新的标准中涂布的都规定了用L形涂布棒，那为什么不能用三角形呢？两者有什么区别吗？
答：都可以用，不是原则问题。
6.大肠杆菌在VRB-MUG平板上描述为发蓝色荧光的菌落，是菌落发荧光吗？还是菌落周围发荧光？我做了几次实验都是菌落周围发荧光，咨询环凯、陆桥的也说是菌落周围发荧光。
答：这个是理解的问题，该荧光物质是水溶性的，菌落分解出荧光物质后会扩散到培养基中。
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